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龙眼核中多酚类抗氧化活性物质的提取优化与液质联用分析
作者:王淑霞  录入日期:2019-12-14 来源 :暨南大学 文献类型 :学位论文 关键词:龙眼核 结构鉴定 多酚类抗氧化物质 抗氧化活性 提取工艺 
描述:本研究以广州石硖龙眼核为研究对象,优化了龙眼核多酚类活性抗氧化物质的浸提条件;采用抗氧化活性跟踪法测定了其抗氧化活性物质的分布;对龙眼核多酚类抗氧化物质进行分离、纯化及结构鉴定。1、在单因素试验基础上,利用试验设计软件Design Expert,采用Box-Behnken Design对龙眼核中多酚类抗氧化活性物质的提提条件进行优化,得到最佳条件为乙醇浓度70%vol,浸提温度77.4℃,浸提时间4h。因素的主效应关系为:浸提温度>浸提时间>乙醇浓度。在最优条件下,龙眼核多酚类抗氧化活性物质一次提取含量可达21.71mg/g。2、龙眼核粗提取物以及其不同极性萃取部位均具有较强的抗氧化活性,含有丰富的多酚类抗氧化活性物质,清除DPPH·的能力和还原能力都很强。其中乙酸乙酯相抗氧化活性最强。3、利用大孔吸附树脂AB-8对抗氧化活性最强的乙酸乙酯相进行分离纯化后,各流份也均有很强的抗氧化活性,且绝大部分流份的抗氧化活性都比相同浓度的抗坏血酸的强,其中流份Fr7和Fr8的清除DPPH·的能力和还原能力都最强,且Fr7组分为无色透明针状或簇状结晶,已被鉴定为没食子酸。4、利用HPLC-ESI-MS对龙眼核提取液进行分离纯化,鉴定出没食子酸、鞣花酸、没食子酰-六羟基联苯-吡喃葡糖、1,2,3-苯三酚、鞣花酸-戊糖共轭体、槲皮黄素-3-O-鼠李糖苷、3-吡啶羧酸、1,2,3,5-四甲基苯、2-乙烷基-1,3,4-三甲基萘、甲硅烷基甲基-硅烷和2,3-二甲基喹啉等11种物质,另外还有24种化合物暂时无法辨别。
龙井绿茶饮料中香气化合物及其与基质的相互作用
作者:廖勇诚  录入日期:2019-12-14 来源 :华中农业大学 文献类型 :学位论文 关键词:龙井茶 相互作用 香气化合物 释放 基质 NMR 模型 
描述:当今世界范围内茶饮料增长迅速,龙井茶因其独特的风味、文化内涵和很高的商业价值而闻名世界。但有关龙井茶的香气化合物及其加工和消费(或泡饮)过程中香气成分的短暂性时效变化则研究甚少,特别是有关茶饮料中香气化合物与其基质的相互作用迄今尚未见文献报道。为此,本论文通过SAFE、SPME、GC/MS、GC/O、2D-GC-TOFMS等方法较为系统地研究了龙井茶的主要香气化合物及其释放规律和短暂性时效变化。采用ID NMR和2D NMR着重讨论了主要香气化合物与基质EGCG的相互作用机制。同时尝试用相关描述符建立了香气化合物在EGCG溶液体系中的QSAR释放模型,预测与实验结果很好吻合。此外,还将SPME/GC/MS与化学计量法结合作为不同产地质量等级龙井茶的化学分类和老化程度的鉴定。上述研究不仅为龙井茶饮料的香气化合物及其与基质的相互作用,以及茶叶原料的质量保证提供了实验数据和可借鉴的思路,同时也为茶饮料香气成分的深入研究提供了更多信息和理论基础。主要研究内容和结果如下:1.龙井绿茶香气化合物的鉴定与短暂性时效关系研究龙井绿茶香气成分通过SAFE与SPME与气相色谱—质谱联用进行了研究,并采用GC/O鉴定了其重要的香气化合物。AEDA研究表明龙井绿茶香气化合物中有45种风味物质的FD因子在20到1000之间。在这些化合物中,香叶醛(花香,草香),α—紫罗兰酮(木香,花香),香叶醇(花香,木香),甲基硫醛(土豆味),1,5—顺式—辛二烯—3—酮(金属味),4—羟基—2,5—二甲基—3(2H)-呋喃酮(焦糖香)有最高的FD因子。在对龙井绿茶茶汤短时间内香气化合物的时效变化及模拟体系中释放规律的研究中,发现并采用化学合成证实了一种新的化合物2—丁基—2—辛烯醛,通过GC/O研究表明这种新的化合物也许可以被用作评测茶叶及茶汤新鲜度的标志化合物。2—丁基—2—辛烯醛是在加热的体系或模拟体系中通过己醛的缩合反应生成,多酚及游离氨基酸可以催化该反应。2.茶饮料体系中香气化合物/基质的相互作用采用模拟体系研究了12种重要龙井茶香气化合物的释放规律。在使用的浓度范围(0.3%-3%干物质质量/体积浓度)内,比较了大分子和小分子基质成分对香气化合物释放的影响,证实茶多酚为影响龙井茶香气化合物释放的最重要基质化合物。不同香气化合物的释放与其自身的特异性化学基团相关,其中羰基与芳香类化合物是与体系中基质相互作用的最重要结构特征。其他低分子量的呈味物质也可能与香气化合物相互作用,最为有趣的是氨基酸。并以甘氨酸为例,采用NMR与MS技术进行了研究。结果显示,甘氨酸可显著降低α,β-不饱和香气化合物(例如香叶醛,1-辛烯-3-酮)的释放。在模拟体系中1-辛烯-3-酮与甘氨酸通过1,4加成反应生成N-1-(3-氧辛基)-甘氨酸。在试验的浓度范围内,高分子质量组分(>1000)对风味物质的释放没有显著的影响。这些结果证明茶汤中的呈味物质也可以调控总的风味以及影响消费者的感官,同时提示真实体系中香气化合物的释放是十分复杂的。1HNMR与NOESY的分析表明羰基与芳香环是主要的结合位点,与EGCG通过H键与π键结合。此外,pH,盐分,温度对香气化合物的释放也有影响。3.茶叶香气化合物在EGCG溶液体系中释放的QSAR研究为了更好的了解与预测茶香气化合物在体系中的释放,本研究提出了一个用于预测茶叶香气化合物在EGCG溶液体系中释放的QSAR模型。该模型采用的描述符由Edragon与Chem3d生成。多元线性回归法与LOO检测法分别用于模型的计算与验证。最优化模型由五个变量即LUMO,BIC3,HATS1e,PCD与E2e组成,模型的R 2 =0.8470,R LOO 2 =0.759,n=41,它可以解释82.5%活性参数值。研究表明,香气化合物与EGCG相互作用的位点及强度与香气化合物的质量因子,范德华体积,偶极矩,极性,电负性,高维构象与取向因子(GETAWAY,3DMorSE,Edgy adjacency indices)等分子性质描述符相关,且与NOE实验结果十分吻合。简单的分子轨道量子描述符HOMO与LUMO的计算证实,可以用来解释相互作用的强度与位点预测。研究表明QSAR不仅可以用来实现对香气化合物释放的预测,也有助于对相互作用机理的深入理解。4.SPME/GC/MS结合化学计量学对龙井茶的分类研究将SPME/GC/MS与化学计量学方法联用,用于不同龙井茶样品的分类鉴定。结果表明,少量的茶叶样品以简单的SPME方法处理,可作为目标性茶叶代谢组学研究。若以未受监控的分类方法(PCA)对茶叶挥发性代谢产物的指纹图谱作直接分析,只有部分龙井茶种类能够被很好的分类,但是并非所有的浙江龙井茶与西湖龙井茶都存在显著性的差异。然而,通过对原始数据的筛选,以PLS方法建立的模型可对茶叶种类,等级,老化状态进行很好的预测。PLS方法同时还揭示了一些茶叶香气化合物可以用作标识物,区分不同性状的茶叶。其中2,2,6-三甲基环己酮指示茶叶老化状态,顺-3-己烯己酸酯指示茶叶等级,醋酸与3-δ-蒈烯指示茶叶种类。
龙井绿茶奶粉的研究
作者:何泊为  录入日期:2019-12-14 来源 :浙江工业大学 文献类型 :学位论文 关键词:咖啡碱 绿茶奶粉 茶多酚 龙井绿茶 
描述:绿茶奶粉融合了牛奶与绿茶,既有营养又有保健效果,已经成为人们研究和关注的热门。对本课题对茶叶最主要成分进行了提取研究,并试制了绿茶奶粉产品,并与直接粉碎的干茶粉做了研究比较,得到了以下实验结论。乙醇溶液提取茶多酚的最佳工艺为:乙醇浓度50%,浸提次数4次,浸提45min,浸提温度为70℃,液固比20。微波辅助提取茶多酚的最佳工艺为:预浸30min,微波解冻档浸提4min,浸提2次,液固比40,乙醇浓度40%。超声波提取茶多酚的最佳工艺为:浸提温度50℃,浸提时间25min,浸提两次,液固比14,乙醇浓度80%。微波浸提咖啡碱的最佳条件为:液固比20,微波解冻档辐照3分钟,浸提3次。超声波最佳浸提条件为:超声功率100%,超声波处理时间25分钟,浸提2次,液固比25,超声温度80℃。微波和超声波浸提效果明显高于索氏浸提。龙井绿茶中茶多糖的平均含量为5.23%,喝该茶对人体十分有益。龙井绿茶中总纤维平均为14.84%,可溶性纤维平均为2.14%,不可溶性纤维平均为12.70%。经过纤维素酶水解,可溶性纤维含量大幅度增加,不可溶性纤维含量大量减少,总纤维素略有减少。龙井绿茶浸提物可以制造绿茶奶粉,龙井绿茶干粉直接与奶粉混合也可制造绿茶奶粉,两种工艺都可行。浸提物制造的绿茶奶粉,在用同样量茶叶原料的前提下,其含绿茶成分少于直接干粉混合的绿茶奶粉。浸提物制造的绿茶奶粉其口感明显好于直接干粉混合的绿茶奶粉,但在颜色、茶风味上又逊于后者。研究结果为下一步研究开发茶叶与乳品融合的新产品提供一些参考。
黔产优质绿茶香气成分分析
作者:谢勋  录入日期:2019-12-14 来源 :贵州大学 文献类型 :学位论文 关键词:香气加工 固相微萃取 气相色谱质谱联用 茶叶香气 主成分分析 
描述:贵州是中国古茶树地发源地,地处云贵高原,由于具有低纬度、高海拔、寡日多雾等地理气候条件,极适合茶树生长,因此产出的茶品质优良。然而,对于贵州茶叶研究却很少,特别是香气。所以,本研究选取贵州典型的三种茶叶(湄潭翠芽、绿宝石、鸟王茶)香气进行研究。主要研究了香气的分析方法,茶叶的加工过程香气变化,茶叶香气的特征组成,湄潭翠芽不同等级香气的差异。期望对提升贵州茶叶品质,保护贵州茶叶品牌提供帮助。本文主要研究结果如下:1.选用顶空固相微萃结合气相色谱质谱的方法,对茶叶香气的萃取条件(萃取温度、萃取时间)和色谱条件进行优化。得出了茶叶香气的最佳萃取温度是80℃,最佳萃取时间是60min;色谱条件为色谱柱选用DB-225中等极性柱,载气流速选用1.3ml/min,程序升温为初始温度40℃,保持15min,然后以3℃/min上升到180℃,保持1min,最后以20℃/min升温到240℃,保持2min。2.对贵州三种绿茶加工过程香气进行分析,得出茶叶加工过程香气物质的变化,这有利于指导贵州茶叶加工。同时,通过得到了三种绿茶中醇类、醛类、烃类、酮类、酯类以及其他化合物种类的变化规律,得出干燥工艺是绿茶加工影响最大,其次是杀青工艺,摊凉和揉捻虽然对香气变化影响不明显,但由于摊凉有利于前体物质香气生成,揉捻有利于细胞破坏,释放更多的香气,也非常重要。3.三种绿茶的基本香气成分都是醇类、醛类、杂环类、酯类、酮类、烃类,但是由于种类及相对比例的差别,导致形成了不同的特征香,其中湄潭翠芽的特征香气成分是顺式-茉莉酮、呋喃型芳樟醇氧化物、吲哚、己酸叶醇酯、芳樟醇、壬醛、苯甲醛;绿宝石的特征香气成分是吲哚、呋喃型芳樟醇氧化物、苯甲醛、顺式-茉莉酮、庚醛、壬醛;鸟王茶的特征香气是甲硫醚、芳樟醇、顺式-茉莉酮、呋喃型芳樟醇氧化物、水杨酸甲酯、壬醛、吲哚。同时聚类分析结果表明同一种茶叶可以很好的聚类,这有利于对茶叶的真假判别以及地理标志保护。4.不同等级湄潭翠芽17个样品进行香气分析,得出他们之间共有的香气有32种,对着32种香气进行分析,选出了其中含量较高,差异比较明显的14种香气成分进行主成分分析,可以初步判定芳樟醇、苯甲醇、水杨酸甲酯、苯乙醛、橙花叔醇、反式-β-紫罗兰酮、苯甲醛、顺式-茉莉酮和香叶醇这几个香气物质是导致不同茶叶等级的重要原因,这对从香气方面指导提升茶叶品质具有重要意义。同时对17种不同等级茶叶以第一和第二主成分作图,得到不同等级茶叶能很好的分开,这对仪器分析茶叶香气等级具有重要意义。
黑茶霉菌对茶叶品质影响的研究--兼论利用霉菌开发茶叶新产品
作者:钱秀萍  录入日期:2019-12-14 来源 :浙江农业大学 文献类型 :学位论文 关键词:△6 含Cytbs结构域的脱氢酶 黑茶藨子 脂肪酸脱氢酶基因 △8 功能鉴定 鞘脂脱氢酶基因 基因克隆 进化关系 酿酒酵母 
描述:黑茶霉菌对茶叶品质影响的研究--兼论利用霉菌开发茶叶新产品
黑茶降血脂功效评价及其对模型大鼠蛋白质差异表达的影响
作者:吴朝比  录入日期:2019-12-14 来源 :湖南农业大学 文献类型 :学位论文 关键词:高脂血症 差异蛋白 黑茶 
描述:本文以六种最具代表性的黑茶(茯砖、普洱、六堡、金尖、米砖、青砖)为材料,对黑茶的主要化学成分进行测定,研究了其对高脂血症模型大鼠血脂的调节作用,并以高脂血症模型大鼠和饲喂了茯砖茶的模型大鼠的肝组织为材料,研究了它们之间的差异表达情况。1、黑茶主要化学成分分析六种黑茶水提物中,咖啡碱含量最高,其次是没食子酸和儿茶素,游离氨基酸总量都较少。金尖茶水提物中游离氨基酸总量为3.56%,其余5种黑茶中游离氨基酸总含量相近,处于1.6%-2.1%范围内。茶多酚含量差异较大,在12%-21%范围内波动,含量从高到低依次为六堡茶、茯砖茶、金尖茶、普洱茶、米砖茶、青砖茶。HPLC测得儿茶素和没食子酸总含量的大小与总多酚含量吻合。2、黑茶调节高脂血症模型大鼠血脂研究灌胃高剂量茯砖茶、普洱茶、六堡茶和青砖茶能有效抑制高脂饮食引起的大鼠体重增长,使大鼠的体重增长值处于正常范围内,具有较好的减肥作用。灌胃高剂量茯砖茶、普洱茶、六堡茶、金尖茶、米砖茶与青砖茶都能显著降低高血脂症模型大鼠的血清和肝匀浆液中TC、TG含量与肝系数,显著升高血清HDL-C含量与A/G比值,但对LDL-C、AST和ALT没有显著作用。肝脏病理学切片表明饲喂黑茶的高脂血症模型大鼠肝细胞变性、肿胀的程度均有所减轻。3、黑茶引起高脂血症模型大鼠肝脏蛋白质差异表达研究以高脂血症大鼠肝脏为材料,建立了重复性较好蛋白提取方法和双向电泳技术体系,并取得了较好的图谱。通过PDQuest软件分析,找到了两组实验大鼠一些差异蛋白点,上调差异蛋白质点共有11个点,下调差异蛋白质点共有21个。
黑茶陈化过程中品质转化研究
作者:谌滢  录入日期:2019-12-14 来源 :湖南农业大学 文献类型 :学位论文 关键词:陈化 感官品质 滋味成分 香气 黑茶 
描述:黑茶具有“越陈越香”的品质特征,备受市场青睐。由于原料、制作工艺等差异,不同产地黑茶与普洱生茶在品质特征和陈化速度方面存在一定的差异。本研究对不同年份六堡茶、茯茶、千两茶、普洱熟茶、普洱生茶(两个品牌)五个类别86份茶叶样品感官品质、水浸出物及主要滋味成分(茶多酚含量、游离氨基酸含量、水溶性糖含量、儿茶素组分及其含量、生物碱组分及其含量、18种氨基酸组分及其含量、7中有机酸组分及其含量)及香气成分进行了分析、比较,采用偏相关方法探讨了各品质成分与样品储存年份的相关性。试验结果表明:随着储存年份延长,干茶色泽褐变,茶条逐渐松散,青气褪而陈香显,滋味出现醇化的趋势。发酵型的黑茶及普洱生茶汤色有红变趋势;原料、工艺、仓储良好的茶叶转化较好,渥堆程度重的茶叶转化差异小。不同类别黑茶及普洱生茶的滋味成分陈化趋势不一,整体表现为水浸出物、茶多酚、游离氨基酸、EGC、DL-C、EGCG、GCG、咖啡碱、乳酸的含量均随陈化呈弱线性降低趋势(P<0.05,R>0.3)发展,水溶性糖、总生物碱、EC、苹果酸、谷氨酸、苏氨酸、脯氨酸、胱氨酸虽随陈化稍有下降,但不构成线性趋势(P<0.05,R<0.3),其余常规品质成分无明显的整体变化现象,但根据茶类、储藏方式的不同具有各自的转变趋势。不同类别茶叶样本,香气差异较大,不同茶类香气成分组成及含量随储藏年份变化的情况也各不相同,各自构成独特的香气类型。陈化过程中以果香、花香和木香为主的醇类、醛类、酮类物质增加,得到23种陈茶共有的特征性香气物质(P<0.05,R>0)为1-己醇、2-乙基己醇、2,6-二甲基环己醇、雪松醇、异植醇、己醛、(E)-2-己烯醛、辛醛、壬醛、(E)-2-辛烯醛、癸醛、苯甲醛、(E)-2-壬烯醛、β-环柠檬醛、2,3-辛二酮、6-甲基-5-庚烯-2-酮、香叶基丙酮、β-紫罗酮、六氢法呢基丙酮、金合欢醇丙酮、二氢猕猴桃内酯、β-紫罗酮氧化物、棕榈酸,得到1种新茶共有的特征性香气物质(P<0.05,R<0)为吡咯,(2Z)-2-戊烯-1-醇为未发酵茶叶特有的陈味物质。本试验结果通过探讨不同类型黑茶、普洱生茶在贮存过程中的品质变化差异及转化趋势,为进一步科学评价和阐释黑茶的陈化机理提供参考。
黑茶调节脂质代谢的作用研究
作者:王丽丽  录入日期:2019-12-14 来源 :湖南农业大学 文献类型 :学位论文 关键词:实时荧光定量PCR 降血脂 基因表达 脂质代谢 黑茶 
描述:高脂血症与动脉粥样硬化症、冠心病、2型糖尿病、肥胖等代谢病的发生密切相关。目前茶及活性组分降脂作用的研究较多,但其作用机制仍尚未清楚。黑茶是我国特有的茶类,且产地与品种花色众多。因此对于黑茶的降脂功效及其机制研究仍需进一步开展。本论文以普洱茶、茯砖茶、六堡茶、金尖茶、青砖茶、米砖茶等6种黑茶为研究材料,分别从动物与细胞两个方面研究了黑茶对脂质代谢的调节作用。16种黑茶对高脂血症大鼠脂质代谢的调节作用研究建立高脂膳食诱导的高脂血症大鼠模型,通过观察黑茶干预后的大鼠摄食量变化与体重增长情况、血脂水平、肝脏病理变化以及脂质代谢相关基因的表达等相关指标,探讨了6种黑茶水提物对高脂血症大鼠脂质代谢的影响。结果表明:(1)整个实验期各组大鼠摄食量无显著差异;与模型对照组相比,各黑茶干预组大鼠体重增长减缓,尤以6种黑茶高剂量组体重减缓明显。(2)与模型对照组比较,6种黑茶高剂量组大鼠血清TC、TG水平显著降低;除米砖茶组外,其余5种黑茶高剂量组大鼠血清HDL-C值显著升高;除普洱高剂量组与茯砖高剂量组LDL-C值显著降低外,其余4种黑茶组LDL-C值变化不显著。(3)除米砖茶外,其余5种黑茶高剂量对肝脏有较好的保护作用,能有效减轻肝脂肪变性程度,尤其以茯砖茶、普洱茶与青砖茶效果最为显著。(4)茯砖茶与青砖茶均能通过部分抑制肝脏内ACAT1、ADRP、DGAT1、 DGAT2mRNA表达来降低血清TC水平及减少肝脏内脂质沉积;而对LCAT mRNA表达无影响。26种黑茶对HepG2脂质代谢的调节作用研究将不同浓度的黑茶水提物作用于高糖诱导培养的HepG2细胞,通过测定细胞活性、TG含量及脂质代谢相关基因如AMPKα-2、ACC1、CHREBP、HL、 SREBP-1c的表达,探讨了黑茶在细胞水平的降脂作用。结果表明:(1)在100-1000μg/mL范围内,随着浓度的不断增大,6种黑茶对细胞的增殖抑制作用愈加明显。浓度为200μg/mL时,6种黑茶对细胞增殖仅有较小的抑制效果。浓度为500μg/mL时,除普洱茶与茯砖茶外,其余4种黑茶对细胞增殖均有显著的抑制效果。(2)与对照组比较,当加茶浓度为500μg/mL时,细胞内TG含量降低。(3)除茯砖茶与金尖茶外,其它4种黑茶可上调AMPKα-2mRNA表达;除茯砖茶与六堡茶外,其它4种黑茶可上调HL mRNA表达;除普洱茶与金尖茶外,其它4种黑茶可下调ACC1与CHREBP mRNA表达;除普洱茶外,其它5种黑茶可下调SREBP1-c mRNA表达。
黑茶藨子(Ribes nigrum L.)含Cytb<,5>结构域脱氢酶基因的克隆与功能研究
作者:陆万香  录入日期:2019-12-14 来源 :西南农业大学 文献类型 :学位论文 关键词:△6 含Cytbs结构域的脱氢酶 黑茶藨子 脂肪酸脱氢酶基因 △8 功能鉴定 鞘脂脱氢酶基因 基因克隆 进化关系 酿酒酵母 
描述:含Cytb_5结构域的脱氢酶是近些年发现的一类新的小家族蛋白,这些蛋白都含有一个标志Cytb_5蛋白特征的血色素结合区:“His-Pro-Gly-Gly domain”;同时,它们还含有膜结合脱氢酶所必需的三个保守的“His Box”,通常为HisⅠ区HK_(3-4)H、HisⅡ区HX_(2-3)HH和HisⅢ区(H/Q)X_(2/3)HH。现已知:Δ6-、Δ5-和Δ4-脂肪酸脱氢酶、脂肪酸羟基化酶以及Δ8-鞘脂脱氢酶是该家族蛋白的主要成员。在植物中,此类蛋白研究最多的是△6-脂肪酸脱氢酶和Δ8-鞘脂脱氢酶,前者是γ-亚麻酸生产中的关键酶,后者可能涉及植物的细胞程序性死亡和抗逆作用,因此具有重要研究意义。本研究以富含γ-亚麻酸的植物黑茶藨子(Ribes nigrum L.)为材料,利用基因组步移方法从黑茶藨子DNA中克隆获得了多个含Cytb_5结构域的脱氢酶基因,通过酿酒酵母异源表达初步鉴定了基因功能,并进行了基因间功能差异和进化关系等方面的分析研究。主要研究结果如下: 1 含Cytb_5结构域脱氢酶基因的克隆 根据已知的Δ6-脂肪酸脱氢酶和Δ8-鞘脂脱氢酶保守区序列设计简并引物,以黑...
黑茶藨子△6-脂肪酸脱氢酶基因的克隆及功能研究
作者:宋丽英  录入日期:2019-12-14 来源 :中国科学院研究生院 文献类型 :学位论文 关键词:脂肪酸脱氢酶 黑茶藨子 Δ6 鞘脂脱氢酶 植物脱氢酶 基因克隆 Δ8 
描述:黑茶藨子△6-脂肪酸脱氢酶基因的克隆及功能研究

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